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金黃色葡萄球菌檢驗解決方案

發(fā)布時(shí)間:2018-01-25      瀏覽次數:7659    分享:

       金黃色葡萄球菌在自然界中無(wú)處不在,空氣、水、灰塵及人和動(dòng)物的排泄物中都可找到。因此,食品受到污染的機會(huì )很多。美國疾病控制中心報告,由金黃色葡萄球菌引起的感染占第二位,僅次于大腸桿菌。金黃色葡萄球菌腸毒素是個(gè)世界性衛生難題,在美國由金黃色葡萄球菌腸毒素引起的食物中毒,占整個(gè)細菌性食物中毒的33%,加拿大則更多,占到45%,中國金黃色葡萄球菌引起的食物中毒事件也時(shí)有發(fā)生。

       一、生物學(xué)特性

       典型的金黃色葡萄球菌為球型,直徑0.5-1μm左右,顯微鏡下排列成葡萄串狀見(jiàn)圖1,圖2。

  

       大多數菌株產(chǎn)生類(lèi)胡蘿卜素,使細胞團呈現出深橙色到淺黃色,色素的產(chǎn)生取決于生長(cháng)條件,故稱(chēng)為金黃色葡萄球菌。金黃色葡萄球菌無(wú)芽胞、鞭毛,大多數無(wú)莢膜,革蘭氏染色陽(yáng)性。金黃色葡萄球菌營(yíng)養要求不高,在普通培養基上生長(cháng)良好,需氧或兼性厭氧,最適生長(cháng)溫度37℃,最適生長(cháng)pH 7.4,干燥環(huán)境下可存活數周。平板上菌落厚、有光澤、圓形凸起,直徑1-2mm。血平板菌落周?chē)纬赏该鞯娜苎h(huán)。金黃色葡萄球菌有高度的耐鹽性,可在10-15%NaCl肉湯中生長(cháng)??煞纸馄咸烟?、麥芽糖、乳糖、蔗糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。甲基紅反應陽(yáng)性,VP反應弱陽(yáng)性。

       二、流行病學(xué)

       (1)季節分布,多見(jiàn)于春夏季;中毒食品種類(lèi)多,如奶、肉、蛋、魚(yú)及其制品。此外,剩飯、油煎蛋、糯米糕及涼粉等引起的中毒事件也有報道。上呼吸道感染患者鼻腔帶菌率83%,所以人畜化膿性感染部位常成為污染源。一般說(shuō),金黃色葡萄球菌可通過(guò)以下途徑污染食品。

       (2)食品加工人員、炊事員或銷(xiāo)售人員帶菌,造成食品污染;食品在加工前本身帶菌,或在加工過(guò)程中受到了污染,產(chǎn)生了腸毒素,引起食物中毒;熟食制品包裝不嚴,運輸過(guò)程受到污染;奶?;蓟撔匀橄傺谆蚯菪缶植炕摃r(shí),對肉體其他部位的污染。

        三、檢測方法

       1、樣品制備: 稱(chēng)取25g樣品至盛有225mL 7.5%氯化鈉肉湯中,固體樣品研磨或置均質(zhì)器中做成1:10的樣品混懸液。若供計數檢驗,可按十進(jìn)制遞增稀釋法將樣品勻液再進(jìn)行適當稀釋。

       2、 增菌與分離培養: 將上述樣品勻液于36℃±1℃培養18h~24h。金黃色葡萄球菌在7.5%氯化鈉肉湯中呈混濁生長(cháng)。將上述培養物,分別劃線(xiàn)接種到Baird-Parker平板和血平板,血平板 36℃±1℃培養18h~24h。Baird-Parker平板36℃±1℃培養24h~48h。 金黃色葡萄球菌在Baird-Parker平板上,菌落直徑為2mm~3mm,顏色呈灰色到黑色,邊緣為淡色,周?chē)鸀橐换鞚釒?,在其外層有一透明圈?jiàn)圖[4]。用接種針接觸菌落有似奶油至樹(shù)膠樣的硬度,偶然會(huì )遇到非脂肪溶解的類(lèi)似菌落;但無(wú)混濁帶及透明圈。長(cháng)期保存的冷凍或干燥食品中所分離的菌落比典型菌落所產(chǎn)生的黑色較淡些,外觀(guān)可能粗糙并干燥。在血平板上,形成菌落較大,圓形、光滑凸起、濕潤、金黃色(有時(shí)為白色),菌落周?chē)梢?jiàn)完全透明溶血圈見(jiàn)圖[5]。挑取上述菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢及血漿凝固酶試驗。

       3、 鑒定: (1) 染色鏡檢: 金黃色葡萄球菌為革蘭氏陽(yáng)性球菌,排列呈葡萄球狀,無(wú)芽孢,無(wú)莢膜,直徑約為0.5μm~1μm。見(jiàn)圖6

  

        (2) 血漿凝固酶試驗: 取0.5ml兔血漿,放入小試管,再加入BHI培養物0.2mL~0.3mL,振蕩搖勻,置36℃±1℃培養,每隔半小時(shí)觀(guān)察一次,連續觀(guān)察6小時(shí),出現凝固即將小管傾斜或倒置,內容物不流動(dòng),判為陽(yáng)性,同時(shí)做陰陽(yáng)對照見(jiàn)圖7。

食品中金黃色葡萄球菌檢驗程序

環(huán)凱提供金黃色葡萄球菌檢驗系列產(chǎn)品,為微生物監控保駕護航:

金黃色葡萄球菌檢驗
用途產(chǎn)品類(lèi)型貨號名稱(chēng)規格
增菌干粉0240107.5%氯化鈉肉湯250g/瓶
顆粒024010P17.5%氯化鈉肉湯(顆粒型)250g/瓶
即用型24010G17.5%氯化鈉肉湯(管裝成品)10mL×10支
即用型CP07007.5%氯化鈉肉湯(袋裝成品)225mL×10袋

樣品

處理

干粉022117磷酸鹽緩沖液(PBS)250g/瓶
即用型CP0640磷酸鹽緩沖液(袋裝成品)225mL×10袋
CP0511A磷酸鹽緩沖液(瓶裝成品)225mL×6瓶
CP0630生理鹽水(袋裝成品)225ml/袋×10
樣品稀即用型CP0310生理鹽水(管裝成品)9mL×20支
分離干粉基礎024040Baird-Parker瓊脂基礎250g/瓶
添加劑029195卵黃亞碲酸鉀增菌液(Baird-Parker瓊脂配套試劑)(小包裝)5mL×5支(小包裝)
029192卵黃亞碲酸鉀增菌液(Baird-Parker瓊脂配套試劑)(大包裝)25mL×6支(大包裝)
即用型024040ABaird-Parker瓊脂平板90mm×20個(gè)/盒
干粉基礎024060血瓊脂基礎250g/瓶
即用型024070血平板90mm×20個(gè)/盒
干粉CRM012金黃色葡萄球菌顯色培養基1000mL/瓶
即用型CRM012A金黃色葡萄球菌顯色培養基平板90mm×20個(gè)/盒

干粉024053腦心浸出液肉湯(BHI)250g/瓶
即用型024053A腦心浸出液肉湯(BHI)(管裝成品)90mm×20個(gè)/盒
干粉022020營(yíng)養瓊脂(NA)250g/瓶
顆粒022020P1營(yíng)養瓊脂(NA)顆粒培養基250g/瓶
即用型024089營(yíng)養瓊脂平板90mm×20個(gè)/盒
鑒定生化管029180凍干血漿10支/盒
產(chǎn)毒實(shí)驗試劑盒354SET01-96葡萄球菌腸毒素檢測試劑盒12條,8孔/條
核酸快速檢測/鑒定FZ004BF2金黃色葡萄球菌核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針?lè )?48test
質(zhì)控菌種陽(yáng)性對照FSCC223005金黃色葡萄球菌 
陰性對照FSCC223011表皮葡萄球菌 

相關(guān)產(chǎn)品

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