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新冠疫情下環(huán)境微生物的監控

發(fā)布時(shí)間：2020-02-28      瀏覽次數：6333    分享：

新冠疫情下，許多人對環(huán)境中的病毒以及傳播方式忐忑不安，尤其是報道了空氣氣溶膠對新冠病毒傳播的影響，并且也對環(huán)境和空間消毒后的效果心存疑慮。目前，關(guān)于開(kāi)展空氣微生物氣溶膠采樣研究較多，根據不同原理制造的采樣器廣泛用于各領(lǐng)域。如：?jiǎn)渭壔蚨嗉壸矒羰讲蓸悠?、離心式采樣器、氣旋式采樣器、液體沖擊式采樣器、過(guò)濾式采樣器等，在這些類(lèi)型采樣器中，以安德森空氣微生物采樣器采樣效率最高，所采粒子數較多。在分級采集不同粒度氣溶膠的時(shí)候，經(jīng)常采用安德森采樣器。早在2010年，中國醫學(xué)科學(xué)院病原學(xué)研究所就進(jìn)行過(guò)用安德森空氣生物采樣器采集病毒氣溶膠的研究。

當然，一般情況下，我們要直接對空氣中的病毒進(jìn)行采樣和檢測還相對比較困難，但是，我們通過(guò)對空氣中常規微生物進(jìn)行采樣和檢測，可以反應出整體環(huán)境的潔凈度，從而評估我們環(huán)境的整體受污染程度和消毒效果。

1.空氣沉降菌：

通過(guò)自然沉降原理收集在空氣中的活微生物粒子，通過(guò)專(zhuān)用的培養基，在適宜的生長(cháng)條件下繁殖到可見(jiàn)的菌落數。沉降菌的采樣屬于被動(dòng)式采樣，反映最終落在地面或物體表面的灰塵中攜帶的微生物。

檢測標準：GB/T 18204.3-2013公共場(chǎng)所衛生檢驗方法 第3部分：空氣微生物

                GB/T 16294-2010 醫藥工業(yè)潔凈室（區）沉降菌的測試方法

檢測方法：常用的檢驗方法是沉降平板法，即測定在一定時(shí)間內從空氣中降落到單位面積地面上的微生物個(gè)數。

操作步驟：將融化的營(yíng)養瓊脂培養基或大豆酪蛋白瓊脂培養基（霉菌監測用沙氏培養基）倒入90mm無(wú)菌培養皿中制成平板（或購買(mǎi)商品化沉降皿），按標準要求布設在監測點(diǎn)上（監測點(diǎn)按標準選擇和布局），打開(kāi)皿蓋暴露在監測環(huán)境中5～30min（動(dòng)態(tài)監測不大于4小時(shí)），讓空氣中的微生物降落在平板表面，蓋好皿蓋，然后倒置放入培養箱中，培養48h后計菌落數（SDA培養5天）。

沉降皿

環(huán)凱牌三層無(wú)菌包裝沉降皿

2.空氣浮游菌

用計數濃度法，即通過(guò)收集懸游在空氣中的生物性粒子，通過(guò)專(zhuān)用的培養基，在適宜的生長(cháng)條件下繁殖到可見(jiàn)的菌落數。浮游菌的采樣屬主動(dòng)采樣，反映潔凈區內空氣中生物粒子的濃度。

檢測標準：《GB/T16293-2010醫藥工業(yè)潔凈室（區）浮游菌的測試方法》

檢測方法：常用撞擊式浮游微生物采樣器，使空氣通過(guò)狹縫或小孔產(chǎn)生高速氣流，從而將懸浮在空氣中的微生物（浮游菌）采集到專(zhuān)門(mén)的平板培養基上，經(jīng)實(shí)驗室培養后得到進(jìn)行菌落計數。

2.1單級浮游微生物采樣器

基于安德森撞擊原理（撞擊法），采集口風(fēng)速與潔凈室內風(fēng)速基本一致的等速采樣理論設計，直接采樣，空氣浮游微生物高速通過(guò)微孔被撞擊在培養皿內的瓊脂表面，撞擊速度20m/s，相當于安德森撞擊6級，保證大于1微米的顆粒全被捕獲收集。

采樣步驟：將浮游微生物采樣器放置在監測點(diǎn)上，卸下多孔采樣頭和保護蓋，用75%酒精對多孔采樣頭和保護蓋、培養皿座及外表進(jìn)行擦拭消毒，然后將預先制作好裝有TSA或SDA培養基的培養皿（或購買(mǎi)商品化平板）放置于培養皿座上，并將培養皿調整至水平，裝好多孔采樣頭，設定采樣參數，開(kāi)機進(jìn)行采樣。采樣結束后，打開(kāi)多孔采樣頭，取出培養皿，蓋回原培養皿蓋，貼上標簽或寫(xiě)上編號，置于已到達設定溫度的恒溫培養箱內，進(jìn)行倒置培養。

浮游微生物采樣器

環(huán)凱牌浮游微生物采樣器

2.2 六級浮游微生物采樣器

整套儀器由六級采樣撞擊器 、采樣控制主機 、六級采樣撞擊器專(zhuān)用三角架組成。六級采樣撞擊器是由六個(gè)帶有經(jīng)硬質(zhì)氧化的鋁質(zhì)多孔撞擊采樣圓盤(pán)組成的 ，多孔撞擊采樣圓盤(pán)上可放置已有采樣介質(zhì)的無(wú)菌平皿 ，所有多孔撞擊采樣圓盤(pán)由三個(gè)彈簧掛鉤把多孔撞擊采樣圓盤(pán)緊密地連接在一起。同級多孔撞擊采樣圓盤(pán)上環(huán)形排列著(zhù)400個(gè)孔徑相同的精準微孔 ，不同級撞擊采樣圓盤(pán)的孔徑不同 。當含有微生物粒子的空氣進(jìn)入采樣口后 ，采樣主機氣體采樣流量恒定 ，而氣體通過(guò)每一級采樣圓盤(pán)不同孔徑的篩孔時(shí) ， 不同大小的微生物粒子按空氣動(dòng)力學(xué)特性分別以不同的速度撞擊在相應的采樣介質(zhì)表面上。第一級-第二級類(lèi)似人體上呼吸道捕獲的粒子 ，第三級－第六級類(lèi)似下呼吸道捕獲的粒子 ，這就在相當程度上模擬了這些粒子在呼吸道的穿透作用和沉著(zhù)部位。

采樣步驟：

1) 將六級采樣撞擊器用75％酒精進(jìn)行擦拭滅菌（或置于高壓蒸汽滅菌器121℃滅菌30分鐘），并妥善保管撞擊器備用。

2) 將撞擊器三角架支開(kāi)并鎖緊，把三角架頂部調至水平，撞擊器放在三角架的云臺上，主機放在桌上或地上，用橡膠管連接撞擊器出氣口→主機進(jìn)氣口。

3) 順序在撞擊器中放入采樣平皿，一手打開(kāi)平皿蓋，另一手迅速蓋上采樣頭（撞擊盤(pán)），然后按住撞擊器上部，掛上三個(gè)彈簧掛鉤。放入和取出采樣平皿時(shí)，必須戴口罩，以防口鼻排出微生物污染平皿。

4) 打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，設定相關(guān)參數，將撞擊器置于監測點(diǎn)，打開(kāi)撞擊器進(jìn)氣口上蓋，離開(kāi)采樣點(diǎn)2米之外，即可啟動(dòng)采樣。

5) 采樣完成后，松開(kāi)拉鉤彈簧，逐層打開(kāi)多孔采樣頭（撞擊盤(pán)），取出培養皿，蓋回原培養皿蓋，貼上標簽或寫(xiě)上編號，置于已到達設定溫度的恒溫培養箱內，進(jìn)行倒置培養。

六級浮游微生物采樣器

環(huán)凱牌六級浮游微生物采樣器
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