一)生化管的使用方法
開(kāi)啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無(wú)菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)鋁蓋,撕開(kāi)鋁蓋,打開(kāi)西林瓶膠塞(如圖1)。
所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
注意:氰化鉀生化管,應盡量將塑帽套緊,以免氰化鉀揮發(fā)造成假陽(yáng)性!
二)致瀉大腸埃希氏菌生化鑒定盒的詳細使用方法
致瀉大腸埃希氏菌僅是大腸埃希氏菌中的一小部分。挑取平板分離的可疑的菌落進(jìn)行革蘭氏染色鏡檢,將疑是致瀉大腸埃希氏
菌的新鮮菌苔置于已配備的無(wú)菌生理鹽水中,與0.5 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內托的凹槽內(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養箱中培養,結果觀(guān)察見(jiàn)表1。
注意:如有特殊的接種方式、培養時(shí)間或培養方式,請詳見(jiàn)每種生化鑒定管附帶的使用說(shuō)明。
三)致瀉大腸埃希氏菌生化鑒定特征 (詳見(jiàn)下生化鑒定程序圖)
1.致瀉大腸埃希氏菌生化鑒定程序圖:

2.血清學(xué)試驗
假定試驗:挑取經(jīng)生化試驗證實(shí)為大腸埃希氏菌的瓊脂培養物,用腸道致病性大腸埃希氏菌、腸道侵襲性大腸埃希氏菌和產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌多價(jià)O血清和腸道出血性大腸埃希氏菌O157血清作玻片凝集。當與某一種多價(jià)O血清凝集時(shí),再與該多價(jià)血清所包含的單價(jià)O血清作試驗。致瀉大腸埃希氏菌所包括的O抗原群見(jiàn)表2。如與某一個(gè)單價(jià)O血清呈現強凝集反應,即為假定試驗陽(yáng)性。
證實(shí)試驗:制備O抗原懸液,稀釋至MacFarland 3號比濁管相當的濃度。原效價(jià)為1:160~1:320的O血清,用0.5%鹽水稀釋至1:40。稀釋血清與抗原懸液再10mm×75mm試管中等量混合,做單管凝集試驗?;靹蚝蠓庞?0℃水浴箱內,經(jīng)16h后觀(guān)察結果。如出現凝集,可證實(shí)為該O抗原。